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GB 5009.17-2014食品中總汞與有機汞的檢測方法
  • 發(fā)布日期:2018-07-19      瀏覽次數(shù):8764
    • 新國標(biāo)GB  5009.17-2014 中規(guī)定了食品中總汞與有機汞的檢測方法,包括原子熒光光譜分析法和冷原子吸收光譜法(適用于食品中總汞的測定)、液相色譜—原子熒光光譜聯(lián)用方法(適用于食品中甲基汞的測定)。

       一、食品中總汞的測定

      1  范圍

      適用于各類食品中總汞的測定。

      法  原子熒光光譜分析法     

      2  原理

      試樣經(jīng)酸加熱消解后,在酸性介質(zhì)中,試樣中汞被硼氫化鉀(KBH4)或硼氫化鈉(NaBH4)還原成原子態(tài)汞,由載氣(氬氣)帶人原子化器中,在汞空心陰極燈照射下,基態(tài)汞原子被激發(fā)至高能態(tài),在由高能態(tài)回到基態(tài)時,發(fā)射出特征波長的熒光,其熒光強度與汞含量成正比,與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

      3  試劑和材料

      3.1  試劑

      3.1.1  硝酸(HNO3)。  

      3.1.2  過氧化氫(H2O2 )    。    

      3.1.3  硫酸(H2SO4)。

      3.1.4  氫氧化鉀(KOH)。

      3.1.5  硼氫化鉀(KBH4):分析純。

      3.2   試劑配置

      3.2.1  硝酸溶液(1+9):量取50mL硝酸,緩緩倒人450mL水中,混勻。

      3.2.2  硝酸溶液(5+95):量取5mL硝酸,緩緩倒人95mL水中,混勻。

      3.2.3  氫氧化鉀溶液(5g/L):稱取5.0g氫氧化鉀,純水溶解并定容至1 000mL,混勻。

      3.2.4  硼氫化鉀溶液(5g/L):稱取5.0g硼氫化鉀,用5.0 g/L的氫氧化鉀溶液溶解并定容至 1 000 mL,混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。 

      3.2.5  重鉻酸鉀的硝酸溶液(0.5g/L):稱取0.05g重鉻酸鉀溶于100mL硝酸溶液(5+95)中。

      3.2.6  硝酸—高氯酸混合溶液(5+1):量取500mL硝酸,100mL高氯酸,混勻。

      3.3    標(biāo)準(zhǔn)品

      (HgCl2):純度≥99%

      3.4     標(biāo)準(zhǔn)溶液配置:

      3.4.1   汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液(1.00 mg/mL):精密稱取0.1354 g經(jīng)干燥過的HgCl2,用重鉻酸鉀的硝酸溶液(0.5g/L)溶解并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,稀釋至刻度,混勻,此溶液濃度為1.00 mg/mL。 于4 ℃冰箱中避光保存,可保存2年?;蛸徺I經(jīng)國家認證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)。

      3.4.2   汞標(biāo)準(zhǔn)中間液(10μg/mL):吸取1.00mL汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液(1.00 mg/mL)于100mL容量瓶中,用重鉻酸鉀的硝酸溶液(0.5g/L)稀釋至刻度,混勻,此溶液濃度為10μg/mL。 于4 ℃冰箱中避光保存,可保存2年。

      3.4.3   汞標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(50ng/mL):吸取0.50mL的汞標(biāo)準(zhǔn)中間液(10μg/mL)于100mL容量瓶中,用0.5g/L重鉻酸鉀的硝酸溶液稀釋至刻度,混勻,此溶液濃度為50ng/mL,現(xiàn)用現(xiàn)配。

      4  儀器和設(shè)備

      注:玻璃器皿及聚四氟乙烯消解內(nèi)罐均需以硝酸溶液(1+4)浸泡24h,用水反復(fù)沖洗,后用去離子水沖洗干凈。

      4.1   原子熒光光譜儀。

      4.2    天平:感量為0.1mg和1mg.

      4.3     微波消解系統(tǒng)。

      4.4     壓力消解器。

      4.5     恒溫干燥箱( 50 ℃~300 ℃)

      4.6     控溫電熱板(50 ℃~200 ℃)

      4.7     超聲水浴箱。

      5  分析步驟

      5.1     試樣預(yù)處理

      5.1.1   在采樣和制備過程中,應(yīng)注意不是試樣污染。

      5.1.2    糧食、豆類等樣品去雜物后粉碎均勻,裝入潔凈聚乙烯瓶中,密封保存?zhèn)溆谩?/span>

      5.1.3    蔬菜、水果、魚類、肉類及蛋類等新鮮樣品,洗凈晾干,取可食部分勻漿,裝入潔凈聚乙烯瓶中,密封,于4℃冰箱冷藏備用。

      5. 2      試樣消解

      5.2.1    壓力罐消解法

      稱取固體試樣0.2g~1.00g(到0.001g),新鮮樣品0.5g~2.0g或液體試樣吸取1mL~5mL稱量(到0.001g),置于消解內(nèi)罐中,加入5mL硝酸浸泡過夜。蓋上內(nèi)蓋,旋緊不銹鋼外套,放入恒溫干燥箱,140℃~160℃保持4h~5h,在箱內(nèi)自然冷卻至室溫,然后緩慢旋松不銹鋼外套,將消解內(nèi)罐取出,用少量水沖洗內(nèi)蓋,放在控溫電熱板上或超聲水浴箱中,于80 ℃或超聲脫氣2min~5min趕去棕色氣體。取出消解內(nèi)罐,將消化液轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中,用少量水分3次洗滌內(nèi)罐,洗滌液合并于容量瓶中并定容至刻度,混勻備用;同時做空白試驗。

      5.2.2    微波消解法

      稱取固體試樣0.2g~0.5g(到0.001g)、新鮮樣品0.2g~0.8g或液體試樣1mL~3mL于消解內(nèi)罐中,加入5~8mL硝酸,加蓋放置過夜,旋緊罐蓋,按照微波消解儀的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟進行消解。冷卻后取出,緩慢打開罐蓋排氣,用少量水沖洗內(nèi)蓋,將消解罐放在控溫電熱板上或超聲水浴箱中,于80 ℃或超聲脫氣2min~5min趕去棕色氣體。取出消解內(nèi)罐,將消化液轉(zhuǎn)移至25mL塑料容量瓶中,用少量水分3次洗滌內(nèi)罐,洗滌液合并于容量瓶中并定容至刻度,混勻備用;同時做空白試驗。

       

      表1  糧食、蔬菜、魚肉類試樣微波消解參考條件

      步驟

      1

      2

      3

      功率(1600W)變化/(%)

      50

      80

      100

      溫度/ ℃

      80

      120

      160

      升溫時間/min

      30

      30

      30

      保溫時間/min

      5

      7

      5

      表2  油脂、糖類試樣微波消解參考條件

      步驟

      1

      2

      3

      4

      5

      功率(1600W)變化/(%)

       

      50

      70

      80

      100

      100

      溫度/℃

      50

      75

      100

      140

      180

      升溫時間/min

      30

      30

      30

      30

      30

      保溫時間/min

      5

      5

      5

      7

      5

      5.2.3   回流消解法    

      5.2.3.1   糧食

      稱取1.0g~4.0g(到0.001g)試樣,置于消化裝置錐形瓶中,加玻璃珠數(shù)粒,加45 mL硝酸、10mL硫酸,轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化,裝上冷凝管后,小火加熱,待開始發(fā)泡即停止加熱,發(fā)泡停止后,加熱回流2h.如加熱過程中溶液變棕色,再加5mL硝酸,繼續(xù)回流2h,消解到樣品*溶解,一般放淡黃色或無色,放冷后從冷凝管上端小心加20mL水,繼續(xù)加熱回流10min,放冷,用適量水沖洗冷凝管,沖洗液并入消化液中,將消化液經(jīng)玻璃棉過濾于100mL容量瓶內(nèi),用少量水洗錐形瓶、濾器,洗液并入容量瓶內(nèi),加水至刻度,混勻。同時做空白試驗。

      5.2.3.2  植物油及動物油脂

      稱取1.0g~3.0g(到0.001g)試樣,置于消化裝置錐形瓶中,加玻璃珠數(shù)粒,加入7mL硫酸,小心混勻至溶液顏色變?yōu)樽厣?,然后?0 mL硝酸,以下按5.2.3.1“裝上冷凝管后,小火加熱……同時做空白試驗”步驟操作。

      5.2.3.3   薯類、豆制品

      稱取1.0g~4.0g(到0.001g)搗碎混勻的試樣(薯類須預(yù)先洗凈晾干),置于消化裝置錐形瓶中,加玻璃珠數(shù)粒及30 mL硝酸、5 mL硫酸,轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化。以下按5.2.3.1“裝上冷凝管后,小火加熱……同時做空白試驗”步驟操作。

      5.2.3.4   肉、蛋類

      稱取0.5g~2.0g(到0.001g)搗碎混勻的試樣,置于消化裝置錐形瓶中,加玻璃珠數(shù)粒及30mL硝酸、5mL硫酸,轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化。以下按5.2.3.1“裝上冷凝管后,小火加熱……同時做空白試驗”步驟操作。

      5.2.3.5  乳及乳制品

      稱取1.0g~4.0g(到0.001g)乳或乳制品,置于消化裝置錐形瓶中,加玻璃珠數(shù)粒及30 mL硝酸,乳加 10mL硫酸,乳制品加5 mL硫酸,轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化。以下按5.2.3.1“裝上冷凝管后,小火加熱……同時做空白試驗”步驟操作。

       

      5.3  測定

      5.3.1  標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

      分別吸取50 ng/mL汞標(biāo)準(zhǔn)使用液0.00mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50 mL于 50 mL容量瓶中,用硝酸溶液(1+9)稀釋至刻度,混勻.各自相當(dāng)于汞濃度為0.00ng/mL、0.20ng/mL、0.50ng/mL、1.00ng/mL、1.50ng/mL、2.00ng/mL、 2.50 ng/mL。

      5.3.2  試樣溶液的測定

      設(shè)定好儀器條件,連續(xù)用硝酸溶液(1+9)進樣,待讀數(shù)穩(wěn)定之后,轉(zhuǎn)入標(biāo)準(zhǔn)系列測量,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線.轉(zhuǎn)入試樣測量,先用硝酸溶液(1+9)進樣,使讀數(shù)基本回零,再分別測定試樣空白和試樣消化液,每測不同的試樣前都應(yīng)清洗進樣器。試樣測定結(jié)果按公式(1)計算。

      5.4   儀器參考條件

      光電倍增管負高壓:240V;汞空心陰極燈電流,30mA;原子化器溫度:300℃;載氣流速:500mL/min;屏蔽氣流速:1 000mL/min。

      6     分析結(jié)果的表述

      試樣中汞的含量按式(1)進行計算。

      式中:

      X——試樣中汞的含量,單位為毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L):

      c——試樣消化液中汞的含量,單位為納克每毫升(ng/mL),

      c0——試劑空白液中汞的含量,單位為納克每毫升(ng/mL),

      V——試樣消化液定容總體積,單位為毫升(mL);

      1000——換算系數(shù);

      m——試樣質(zhì)量,單位為克或毫升(g或mL).

      計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

      7  精密度

      在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的差值不得超過算術(shù)平均值的20%。

      8  其他

      當(dāng)樣品稱樣量為0.5g,定容體積為25mL時,方法檢出限0.003mg/kg,方法定量限0.010mg/kg。

       

      第二法  冷原子吸收光譜法

       

      9   原理

           汞蒸氣對波長253.7nm的共振線具有強烈的吸收作用。試樣經(jīng)過酸消解或催化酸消解使汞轉(zhuǎn)為離子狀態(tài),在強酸性介質(zhì)中以氯化亞錫還原成元素汞,載體將元素汞吹入汞測定儀,進行冷原子吸收測定,在一定濃度范圍其吸收值與汞含量成正比,外標(biāo)法定量.

       

      10  試劑和材料

      注:除非另有說明,所用試劑均為優(yōu)級純,水為GB/T 6682 規(guī)定的一級水。

      10.1  試劑

      10.1.1   硝酸(HNO3)。  

      10.1.2   鹽酸(HCl)。

      10.1.3   過氧化氫(H2O2)(30%)。

      10.1.4   無水氯化鈣(CaCl2):分析純。

      10.1.5   高錳酸鉀(KMnO4):分析純。
      10.1.6   重鉻酸鉀(K2Cr2O7):分析純。

      10.2     試劑配置

      10.2.1  高錳酸鉀溶液(50g/L):稱取5.0g高錳酸鉀置于100mL棕色瓶中,以水溶解稀釋至100mL。

      10.2.2  硝酸溶液(5+95):量取5mL硝酸,緩緩倒入95 mL水中,混勻。

      10.2.3  重鉻酸鉀的硝酸溶液(0.5g/L):稱取0.05g重鉻酸鉀溶于100mL硝酸溶液(5+95)中。

      10.2.4   氯化亞錫溶液(100 g/L);稱取10 g氯化亞錫溶于20mL鹽酸中,90 ℃水浴中加熱,輕微振蕩,待氯化亞錫溶解成透明狀后,冷卻,純水稀釋定容至100mL,加入幾粒金屬錫,置陰涼、避光處保存。一經(jīng)發(fā)現(xiàn)渾濁應(yīng)重新配制。

      10.2.5   硝酸溶液(1+9):量取50mL硝酸,緩緩加入450mL水中。

      10.3    標(biāo)準(zhǔn)品

               (HgCl2):純度 ≥99 %。

      10.4    標(biāo)準(zhǔn)溶液配置

      10.4.1 汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液(1.00mg/mL):準(zhǔn)確稱取0.135 4g干燥過的HgO,用重鉻酸鉀的硝酸溶液(0.5g/L)溶解并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,定容。此溶液濃度為1.00mg/mL。于4 ℃冰箱中避光保存,可保存兩年?;蛸徺I經(jīng)國家認證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)。

      10.4.2  汞標(biāo)準(zhǔn)中間液(10μg/mL):吸取1.00mL汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液(1.00 mg/mL)于100mL容量瓶中,用重鉻酸鉀的硝酸溶液(0.5g/L)稀釋和定容。此溶液濃度為10μg/mL。 于4 ℃冰箱中避光保存,可保存兩年。

      10.4.3   汞標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(50ng/mL):吸取0.50mL的汞標(biāo)準(zhǔn)中間液(10μg/mL)于100mL容量瓶中,用0.5g/L重鉻酸鉀的硝酸溶液稀釋和定容,此溶液濃度為50ng/mL,現(xiàn)用現(xiàn)配。

      11  儀器和設(shè)備

      注:玻璃器皿及聚四氟乙烯消解內(nèi)罐均需以硝酸溶液(1+4)浸泡24h,用水反復(fù)沖洗,后用去離子水沖冼干凈。

      11.1  測汞儀(附氣體循環(huán)泵、氣體干燥裝置、汞蒸氣發(fā)生裝置及汞蒸氣吸收瓶),或 全自動測汞儀。

      11.2  天平:感量為0.1mg和1mg。

      11.3  微波消解系統(tǒng)。

      11. 4  壓力消解器。

      11.5   恒溫干燥箱(200 ℃~300 ℃)。

      11.6   控溫電熱板(50 ℃~200 ℃)。

      11.7   超聲水浴箱。

      12      分析步驟

      12.1  試樣預(yù)處理

               見 5.1。

      12. 2  試樣消解(可根據(jù)實驗室條件選用以下任何一種方法消解)

      12.2.1   壓力罐消解法

                  見  5.2.1 。

      12.2.2   微波消解法。

                   見  5.2.2 。

      12.2.3   回流消解法。

                   見  5.2.3  。

      12.3    儀器參考條件。

                打開測汞儀,預(yù)熱1h,并將儀器性能調(diào)至狀態(tài)。

      12.4    標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

                分別吸取汞標(biāo)準(zhǔn)使用液(50 ng/mL)0.00mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50 mL于 50 mL容量瓶中,用硝酸溶液(1+9)稀釋至刻度,混勻.各自相當(dāng)于汞濃度為0.00ng/mL、0.20ng/mL、0.50ng/mL、1.00ng/mL、1.50ng/mL、2.00ng/mL、 2.50 ng/mL。將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液分別置于測汞儀的汞蒸汽發(fā)生器中,連接抽氣裝置,沿壁迅速加入3.0mL還原劑氯化亞錫(100 g/L),迅速蓋緊瓶塞,隨后有氣泡產(chǎn)生,立即通入流速為1.0L/min 的氮氣或經(jīng)活性炭處理的空氣,使汞蒸汽經(jīng)過氯化鈣干燥管進入測汞儀中,從儀器讀數(shù)顯示的高點測得其吸收值。然后,打開吸收瓶上的三通閥將產(chǎn)生的剩余汞蒸汽吸收于高錳酸鉀溶液(50g/L)中,待測汞儀上的讀數(shù)達到零點時進行下一次的測定。同時做空白試驗。求得吸光度值與汞質(zhì)量關(guān)系的一元線性回歸方程。

       

      12.5  試樣溶液的測定

            分別稱取樣液和試劑空白液各5.0mL置于測汞儀的汞蒸汽發(fā)生器的還原瓶中,以下按照12.4 “連接抽氣裝置......同時做空白試驗”進行操作。將所測得的吸光度值,代入標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的一元線性回歸方程中求得試樣溶液中汞含量。

       

      13       分析結(jié)果的表述

      試樣中汞含量按式(2)進行計算:

      式中:

      X——試樣中汞含量,單位為毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L);

      m1——測定樣液中汞質(zhì)量,單位納克(ng);

      m2——空白液中汞質(zhì)量,單位納克(ng);

      V1——試樣消化液定容總體積,單位為毫升(mL);

      1000——換算系數(shù);

      V2——測定用樣液體積,單位為亳升(mL);

      m——試樣質(zhì)量,單位為克或毫升(g或mL)。

      計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

       

      14   精密度

      在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的差值不得超過算術(shù)平均值的20%。

       

      15   其他

             當(dāng)樣品稱樣量為0.5g,定容體積為25mL時,方法檢出限0.002mg/kg,方法定量限0.007mg/kg。

       

                                                              食品中甲基汞的測定

      液相色譜—原子熒光光譜聯(lián)用方法

      16  原理

            食品中的甲基汞經(jīng)超聲波輔助5 mol/L鹽酸溶液提取后,選用C18反向色譜柱分離,色譜流入液進入在線紫外消解系統(tǒng),在紫外光照射下與強氧化劑過硫酸鉀反應(yīng),甲基汞轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機汞。酸性環(huán)境下,無機汞與硼氫化鉀在線反應(yīng)生成汞蒸汽,由原子熒光光譜儀測定。由保留時間定性,外標(biāo)法峰面積定量。

       

      17  試劑和材料

      17.1   試劑

      17.1.1    甲醇(CH3OH):色譜純。

      17.1.2   氫氧化鈉(NaOH)。

      17.1.3   氫氧化鉀(KOH)。

      17.1.4   硼氫化鉀(KBH4):分析純。

      17.1.5   過硫酸鉀(K2S2O8):分析純。

      17.1.6   乙酸銨(CH3COONH4):分析純。

      17.1.7    鹽酸(HCl)。

      17.1.8    氨水(NH3.H2O)。

      17.1.9    L-半胱氨酸(L—HSCH2CH(NH2)COOH):分析純。

      17.2      試劑配置

      17.2.1   流動相(5%的甲醇+0.06mol/L乙酸銨+0.1%  L-半胱氨酸):稱取0.5g L-半胱氨酸,2.2g乙酸銨,置于500mL容量瓶中,用水溶解,再加入25mL甲醇,后用水定容至500mL。經(jīng)0.45μm有機系濾膜過濾后,于超聲水浴中超聲脫氣30min。現(xiàn)用現(xiàn)配。

      17.2.2   鹽酸溶液(5mol/L):量取208mL鹽酸,溶于水并稀釋至500mL。

      17.2.3   鹽酸溶液10%(體積比):量取100mL鹽酸,溶于水并稀釋至1000mL。

      17.2.4   氫氧化鉀溶液(5 g/L):稱取5.0g氫氧化鉀,溶于水并稀釋至1000mL。

      17.2.5   氫氧化鈉溶液(6 mol/L):稱取24 g氫氧化鈉,溶于水并稀釋至100mL。

      17.2.6   硼氫化鉀溶液( 2 g/L):稱取2.0 g硼氫化鉀,用 氫氧化鉀溶液(5 g/L)溶解配稀釋至1000mL?,F(xiàn)用現(xiàn)配。

      17.2.7   過硫酸鉀溶液(2 g/L):稱取1.0 g過硫酸鉀,用 氫氧化鉀溶液(5 g/L)溶解配稀釋至500mL。現(xiàn)用現(xiàn)配。

      17.2.8   L-半胱氨酸溶液(10g/L):稱取0.1g  L-半胱氨酸,溶于10mL水中?,F(xiàn)用現(xiàn)配。

      17.2.9   甲醇溶液(1+1):量取甲醇100mL,加入100mL水中,混勻。

      17.3   標(biāo)準(zhǔn)品

      17.3.1  (HgCl2):純度≥99%。

      17.3.2  氯化甲基汞(HgCH3Cl):純度≥99%。

      17.4     標(biāo)準(zhǔn)溶液配置:

      17.4.1  HgCl2標(biāo)準(zhǔn)儲備液(200μg/mL,以汞計):準(zhǔn)確稱取0.0270gHgO,用重鉻酸鉀的硝酸溶液(0.5g/L)溶解,并稀釋、定容至100mL。于4 ℃冰箱中避光保存,可保存兩年?;蛸徺I經(jīng)國家認證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)。

      17.4.2  甲基汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液(200μg/mL,以汞計):準(zhǔn)確稱取0.0250g氧化甲基汞,加少量甲醇溶解,用甲醇溶液(1+1)稀釋和定容至100mL。于4 ℃冰箱中避光保存,可保存兩年。或購買經(jīng)國家認證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)。

      17.4.3   混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00μg/mL,以汞計):準(zhǔn)確移取0.50mL甲基汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液和0.5mL HgCl2標(biāo)準(zhǔn)儲備液,置于100mL容量瓶中,以流動相稀釋至刻度,搖勻。此混合標(biāo)準(zhǔn)使用液中,兩種汞化合物的濃度均為1.00μg/mL,現(xiàn)用現(xiàn)配。

       

      18    儀器和設(shè)備

      注:玻璃器皿均需以硝酸溶液(1+4)浸泡24h,用水反復(fù)沖洗,后用去離子水沖冼干凈。

      18.1  液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀(LC-AFS):由液相色譜儀(包括液相色譜泵和手動進樣閥)、在線紫外消解系統(tǒng)及原子熒光光譜儀組成。

      18.2  天平:感量為0.1mg和1.0mg。

      18.3  組織勻漿器。

      18.4  高速粉碎機。

      18.5  冷凍干燥機。

      18.6  離心機:大轉(zhuǎn)速10000r/min。

      18.7   超聲清洗器。

       

      19   分析步驟

      19.1  試樣預(yù)處理

               見 5.1 。

      19.2  試樣提取

               稱取樣品0.50 g~2.0g(至0.001g),置于15mL塑料離心管中,加入10mL的鹽酸溶液(5mol/L),放置過夜。室溫下超聲水浴提取60  min,期間振搖數(shù)次。4 ℃下以8000r/min轉(zhuǎn)速離心 15min。準(zhǔn)確吸取2.0mL上清液至5mL容量瓶或刻度試管中,逐滴加入氫氧化鈉溶液(6 mol/L),使樣液pH為2~7。加入0.1mL的  L-半胱氨酸溶液(10g/L),后用水定容至刻度。0.45μm有機系濾膜過濾,待測。同時做空白試驗。

      注:滴加氫氧化鈉溶液(6 mol/L)時應(yīng)緩慢逐滴加入,避免酸堿中和產(chǎn)生的熱量來不及擴散,使溫度很快升高,導(dǎo)致汞化合物揮發(fā),造成測定值偏低。

      19.3   儀器參考條件

      19.3.1  液相色譜參考條件

      液相色譜參考條件如下:     

      ——色譜柱:C18分析柱(柱長150mm,內(nèi)徑4.6mm,粒徑5 μm),C18預(yù)柱(柱長10mm,內(nèi)徑4.6mm,粒徑5 μm)。

      ——流速:1.0mL/min。

      ——進樣體積:100μL。

      19.3.2   原子熒光檢測參考條件

      原子熒光檢測參考條件

      原子熒光檢測參考條件如下:

      ——負高壓:300V;

      ——汞燈電流:30mA;

      ——原子化方式:冷原子;

      ——載液:10%鹽酸溶液;

      ——載液流速:4.0mL/min;

      ——還原劑:2 g/L硼氫化鉀溶液;

      ——還原劑流速:4.0mL/min。

      ——氧化劑:2 g/L過硫酸鉀溶液,氧化劑流速1.6 mL/min。

      ——載氣流速:500mL/min。

      ——輔助氣流速:600mL/min。

      19.4   標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

      取5支10 mL容量瓶,分別準(zhǔn)確加入混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(1.00μg/mL)0.00mL、0.010mL、0.020mL、0.040mL、0.060mL和0.10mL,用流動相稀釋至刻度。此標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的濃度分別為0.0ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、4.0ng/mL、6.0ng/mL和10.0ng/mL。吸取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液100μL 進樣,以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)化合物的濃度為橫坐標(biāo),以色譜峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

      試樣溶液的測定:將試樣溶液100μL注入液相色譜—原子熒光光譜聯(lián)用儀中,得到色譜圖,以保留時間定性。以外表法峰面積定量。平行測定次數(shù)不少于兩次。標(biāo)準(zhǔn)溶液及試樣溶液的色譜圖參考如下:

      圖1   標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

       圖1   標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

      圖 2.試樣(鯉魚肉色譜圖):

      20   分析結(jié)果的表述

      試樣中甲基汞含量按式(3)計算。

      式中:

       

      X——試樣中甲基汞的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);

      f——稀釋因子;

      c——經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的測定液中甲基汞的濃度,單位為納克每毫升(ng/mL);

      c0——經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白溶液中甲基汞的濃度,單位為納克每毫升(ng/mL);

      V——加入提取試劑的體積,單位為毫升(mL);

      1000——換算系數(shù);

      m——試樣稱樣量,單位為克(g)

      計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

       

      21   精密度

      在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的差值不得超過算術(shù)平均值的20%。

       

      22  其他

      當(dāng)樣品稱樣量為1g,定容體積為10mL時,方法檢出限為0.008 mg/kg ,方法定量限為0.025 mg/kg。

       

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